Resumo A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) causada pela Leishmania (Leishmania) infantum e transmitida por flebotomíneos e é uma das principais zoonoses do Brasil que se encontra em expansão em estados da região sul do país, sendo os cães o principal reservatório urbano do parasito. O presente estudo investigou a ocorrência de LVC em dois municípios, Erval Velho e Herval d’Oeste localizados no meio-oeste de Santa Catarina. Para tanto, amostras de sangue periférico de 126 cães foram coletadas em ambas as cidades e submetidas à detecção de anticorpos anti-L. infantum por meio de testes de ELISA e imunofluorescência indireta (IFI), bem com a detecção de k-DNA pela reação em cadeia de polimerase (PCR). Além disso, também foram observados os sintomas clínicos e as condições ambientais associadas a esses animais. Dos cães examinados, 35,7% (45/126) foram positivos para pelo menos um dos três testes, dois cães (1,6%) foram positivos em todos os três testes, 12 cães (9,5%) foram positivos tanto no ELISA quanto na IFI, enquanto 21 cães (16,7%) foram positivos para ELISA e 15 (11,9%) para o IFI. A amplificação do k-DNA de L. infantum foi positiva em 9 dos 126 cães (7,1%). Entre os cães positivos seis apresentaram um ou mais sintomas clínicos correlacionados com a LVC. Esses resultados confirmaram a ocorrência de LVC na região e destacaram a importância do monitoramento e implementação de medidas de controle para a LVC nessa região

Abstract Canine visceral leishmaniasis (CVL) caused by Leishmania (Leishmania) infantum is transmitted by phlebotomine sandflies and a major zoonotic disease in Brazil. Due to the southward expansion of the disease within the country and the central role of dogs as urban reservoirs of the parasite, we have investigated the occurrence of CVL in two municipalities Erval Velho and Herval d’Oeste in the Midwest region of Santa Catarina state. Peripheral blood samples from 126 dogs were collected in both cities and tested for anti-L. infantum antibodies by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescence reaction (IIF) and for the presence of parasite DNA by polymerase chain reaction (PCR) in peripheral blood. From examined dogs, 35.71% (45/126) were positive for at least one of the three tests and two (1.6%) were positive in all performed tests. Twelve dogs (9.5%) were positive for both ELISA and IIF, while 21 dogs were exclusively positive for ELISA (16.7%), and 15 (11.9%) for IIF. L. infantum k-DNA was detected by PCR in 9 out of 126 dogs (7.1%) and clinical symptoms compatible with CVL were observed for 6 dogs. Taken together, these results indicate the transmission of CVL in this region, highlighting the needs for epidemiological surveillance and implementation of control measures for CVL transmission in this region.

Resumo As regiões que cultivam milho como cultura principal ainda não possuem tecnologias adequadas para mensurar as perdas na produtividade decorrentes na disponibilidade irregular de água. O objetivo desse estudo foi avaliar as características fisiológicas de híbridos de milho tolerante (DKB 390) e sensível (BRS1030) à seca, no estádio de crescimento V5 e sob restrição hídrica, para compreender os mecanismos envolvidos na indução de tolerância à seca pela quitosana em genótipos contrastantes. As plantas foram cultivadas vasos na casa de vegetação e a quitosana 100 ppm foi aplicada por pulverização foliar. A restrição hídrica durou 10 dias e foram avaliadas as trocas gasosas e a fluorescência da clorofila. O híbrido tolerante (DKB 390) apresentou maior fotossíntese, condutância estomática, eficiência de carboxilação, taxa de transporte de elétrons e quenching não fotoquímico quando aplicada a quitosana. As plantas do genótipo tolerante tratadas com quitosana foram mais tolerantes ao déficit hídrico porque foram mais responsivas ao biopolímero.

Abstract It is a fact that the regions that cultivate the most maize crop do not have fully adequate technologies to measure productivity losses caused by irregularities in water availability. The objective of this study was to evaluate the physiological characteristics of maize hybrids tolerant (DKB 390) and sensitive (BRS 1030) to drought, at V5 growth stage and under water restriction, in order to understand the mechanisms involved in the induction of tolerance to drought by chitosan in contrasting maize genotypes. Plants were cultivated in pots at a greenhouse, and chitosan 100 ppm was applied by leaf spraying. The water restriction was imposed for 10 days and then leaf gaseous exchange and chlorophyll fluorescence were evaluated. The tolerant hybrid (DKB 390) showed higher photosynthesis, stomatal conductance, carboxylation efficiency, electron transport rate, and non-photochemical quenching when chitosan was used. Plants from tolerant genotype treated with chitosan were more tolerant to water stress because there were more responsive to the biopolymer.

RESUMO Este artigo trata do problema de dimensionamento de lotes com máquinas paralelas flexíveis, que consiste basicamente em determinar a quantidade de itens a serem produzidos, em cada uma das máquinas, em um horizonte de tempo finito, satisfazendo uma demanda pré-estabelecida. Este problema tem origem econômica e envolve custos de produção, estoque e preparação de máquinas. No problema padrão, cada item pode ser produzido em qualquer uma das máquinas, ou seja, tem-se a flexibilidade total de máquinas. No entanto, nem sempre é viável ter flexibilidade total das máquinas, devido aos altos custos relacionados. Portanto, pode ser de grande importância implementar apenas uma flexibilidade limitada das máquinas. A consideração ou não da flexibilidade de uma máquina para produzir um produto específico torna-se uma variável de decisão e há um custo de investimento associado a estas decisões. Uma formulação matemática para esse problema foi proposta na literatura e os resultados computacionais obtidos por meio de um pacote de otimização combinatória mostraram que resolvê-la pode ser uma tarefa difícil, especialmente para instâncias com muitos itens. Sendo assim, neste trabalho foram propostas três heurísticas para o problema, com intuito de buscar boas soluções em baixos tempos computacionais. Experimentos foram realizados para comparar as heurísticas com a resolução do modelo via pacote de otimização. Pôde-se observar que conforme o número de itens e de máquinas foram aumentando, as soluções com melhor qualidade foram obtidas por apenas uma das heurísticas. Em termos de tempos computacionais, todas as heurísticas obtiveram em média tempos inferiores aos do CPLEX.

ABSTRACT This work is related to the lot sizing problem with flexible parallel machines, which basically consists in determining the quantity of items to be produced, on each of the machines, in a finite time horizon, satisfying a given demand. This problem has an economic origin and involves costs of production, inventory and setup. In the standard problem, each item can be produced on any of the machines, i.e., we have the total machine flexibility. However, it is not always feasible to have total machine flexibility due to the costs. Therefore, it may be important to implement only a limited amount of flexibility. The investment of upgrading a machine to produce a specific product becomes a binary decision variable and there is a global budget on investment decisions. A mathematical formulation to this problem was proposed in the literature and the computational results obtained throwgh a combinatorial optimization package showed that solve the formulation is very difficult, especially for instances with many items. So in this work we have proposed three different heuristics for this problem, in order to find good solutions in low computational times. Experiments were performed to compare the heuristics with the resolution of the model via optimization package. We have seen that by increasing the number of items and machines, the results with better quality were obtained by only one of the heuristics. In terms of computational times, all the heuristics achieved inferior times in average over CPLEX.

Resumo As espécies de maracujá apresentam grande importância econômica, tanto para o consumo in natura, quanto para a indústria. A principal maneira de propagar essas espécies é por sementes; contudo, a presença de arilo e condições ambientais pode inibir a germinação. Nesse sentido, objetivou-se estudar o efeito de métodos de remoção do arilo e luminosidade na qualidade e germinação das sementes de Passiflora edulis var. flavicarpa. Cinco métodos foram empregados para a remoção do arilo: (1) fricção em peneira de malha de aço por cinco minutos; (2) fricção com areia grossa em peneira de malha de aço por cinco minutos; (3) imersão em solução de cal a 10% (m/v), por 30 minutos; (4) fermentação da polpa em solução de açúcar a 10% (m/v), por 48 horas; e (5) fermentação natural da polpa, por cinco dias. As sementes foram submetidas ao teste de germinação no escuro e no claro, teste de comprimento de plântulas e teste de emergência. Independente do método de remoção do arilo, a porcentagem de germinação no claro apresentou-se menor em comparação ao escuro, com destaque para o tratamento de fermentação natural da polpa, o qual apresentou 86% de sementes germinadas. Por outro lado, os métodos de remoção do arilo não afetaram a emergência das plântulas, com porcentagem de emergência variando entre 88 a 94%.

Abstract Passion fruits species presents a larger economic importance for in natura consumption and industry. The main way to propagate these species is by seeds; however, the aril presence and environmental conditions may inhibit the seeds germination. In this sense, the objective of this study was to evaluate the effect of aril removal methods and light conditions on P. edulis var. flavicarpa seeds quality and germination. There were used five methods to remove the seeds aril: (1) friction on steel mesh sieve for 5 minutes; (2) friction with coarse sand on steel mesh sieve for 5 minutes; (3) immersion in lime solution at 10% (w/v), for 30 minutes; (4) fermentation in sugar solution at 10% (w/v), during 48 hours; and (5) natural pulp fermentation, during five days. The seeds were submitted to germination test at darkness and lightness, as well as, to length seedlings and emergence test. Regardless the aril removal method, the germination percentage was lower at lightness than darkness highlighting the natural pulp fermentation treatment, which presented 86% of seeds germinated. On the other hand, the aril removal methods did not affect the seedlings emergence, with emergence percentages ranged from 88 to 94%.

Resumo O sistema rodoviário federal brasileiro é constituído em grande parte por pontes construídas antes de 1984. Assim, essas pontes possuem geometria e capacidade de carga incompatíveis com o tráfego atual. Nesse cenário, o objetivo deste estudo foi a avaliação dos procedimentos de alargamento e reforço empregados em uma ponte de concreto armado que foi reabilitada, visando atender às novas exigências de uma rodovia que foi duplicada. O estudo também inclui a comparação do seu desempenho com a ponte nova, também em concreto armado, que foi construída ao lado para receber a pista nova. Esta comparação se mostra adequada, considerando que ambas as pontes são inseridas no mesmo microclima, estão sujeitas às mesmas características de tráfego e têm vãos e sistemas estruturais semelhantes.Os resultados obtidos permitem conhecer a eficácia das intervenções de alargamento e reforço realizadas, sob o ponto de vista da durabilidade, contribuindo para a melhoria de projetos futuros de reabilitação de pontes rodoviárias de concreto armado.

Abstract The Brazilian federal highway system is largely made up of reinforced concrete (RC) bridges built prior to 1984. Thus, these bridges have incompatible geometry and loading carrying capacity with nowadays traffic. In this scenario, the goal of this investigation was the evaluation of the widening and strengthening procedures used in these RC bridges. The study also includes comparing their performance with the respective new bridges built next to them, which received new highway lanes. This comparison is adequate, considering that, both bridges are inserted in the same environment, are subjected to the same traffic characteristics and have similar spans and structural systems. The results obtained allow us to know the effectiveness of the widening and strengthening interventions carried out, from the point of view of durability, contributing to the improvement of future rehabilitation design for reinforced concrete highway bridges.

Resumo Vários cruzeiros de investigação foram realizados no Atlântico Nordeste, arquipélago da Madeira entre 1991 e 2008 visando a exploração de novos recursos pesqueiros. O presente estudo contemplou a comparação da seletividade de pesca entre armadilhas de fundo e flutuantes e a análise de rendimento por recruta (YPR) e biomassa por recruta (BPR) facultando informação essencial para a gestão do camarão Plesionika narval. Um total de 28,262 especimens foram amostrados e a análise de comprimento de primeira captura retornou valores mais elevados aquando da utilização de armadilhas flutuantes, indicando que essas armadilhas são mais seletivas e exercem menos pressão sobre o recurso. A análise YPR e BPR mostrou que o estoque se encontra sob explorado para a área de estudo e recomenda a utilização de armadilhas flutuantes na pesca comercial de P. narval, que permitirão um limite máximo de exploração com rendimento superior. Os resultados sugerem que P. narval tem o potencial para suportar uma pescaria viável e sustentável mediante a utilização de armadilhas flutuantes.

Abstract Several experimental surveys were carried out in the Northeastern Atlantic, Madeira archipelago from 1991 to 2008 to explore new fisheries resources. This study examined the selectivity of bottom and floating traps and the analysis of yield-per-recruit (YPR) and biomass-per-recruit (BPR) providing helpful insight to the management of the shrimp Plesionika narval. A total of 28,262 specimens were sampled and the analysis of length at first capture returned higher values when using floating traps indicating that these traps are more selective, exerting less pressure on the resource. The YPR and BPR analysis showed that the stock is under exploited for the studied area and suggests that the use of floating traps in the commercial fisheries of P. narval is recommended, which will allow a higher maximum allowable limit of exploitation and greater yield. The results suggest that P. narval has the potential to support a viable and sustainable fishery using floating traps.

Brazilian poultry production is very efficient and demands maximum broiler performance. Therefore, digestive system pathologies have a relevant role. Considering it is difficult to obtain consistent information on intestinal morphometric analysis, this study aimed at establishing essential and clear criteria for the collection of intestinal segments for morphometric analysis. Fifteen 13-d-old broilers were sacrificed and three intestinal segments were collected per bird. Two 3-cm long sections were obtained from each of the intestinal segments. Samples were collected open or closed. The closed samples were transversely, hemicylindrically, or longitudinally sectioned. Samples were processed and stained with hematoxylin and eosin. The number of microscopic fields in each section was counted. Villi presenting the base clearly embedded in the submucosa, no damage or folds, and simple columnar epithelium at the tip were considered adequate for measurements. These villi were counted in each sample. The results shows that hemicylindrical sections presented the highest number of observation fields, with an average of 9.76 fields. Jejunum samples were among the three highest average villi counts, with 18.23 in longitudinal sections and 15.61 in hemicylindrical sections. The results of the present study indicate that hemicylindrical sectioning and jejunal samples were, respectively, the best sectioning method and the best intestinal segment for the morphometric analysis of the intestines of broilers.

This study analyzes the heat transfer in human eyes following implantation of retinal prostheses using an axisymmetric formulation of the Finite Volume Method. The model used consisted of a vertex centered unstructured grid finite volume method in an edge-based data structure and an explicit time integration. The results of the finite volume thermal analysis in ocular tissues were determined in the presence of two types of retinal implants: subretinal and epiretinal. For the subretinal device, the maximum temperature reached in the retina was 36.78°C (309.78 K) and the irreversible thermal damage occurred at 200 days. In the case of the epiretinal implant, the maximum temperature reached at the retinal/chip interface was 36.92°C (309.92 K) and the irreversible thermal damage occurred at 180 days. Our results indicate that tin spite of its higher dissipation power, the epiretinal implant produces thermal damages similar to that caused by the subretinal implant. The computational tool which was developed was able to effectively calculate temperature profiles and thermal damage values to retinal implants and is also capable to calculate temperature profile in any other geometry of interest, for example with other types s of external thermal source like laser beans.

A peritonite mantém-se uma complicação grave em doentes submetidos a diálise peritoneal, sendo uma causa importante de internamento, mortalidade e perda da viabilidade do catéter, implicando o recurso à hemodiálise. A colonoscopia poderá ser um factor de risco, presumivelmente por translocação bacteriana. As actuais recomendações sobre antibioterapia profilácica não especificam a abordagem neste subgrupo de doentes. Caso clínico: Um doente de 57 anos sob diálise peritoneal desenvolveu um quadro de peritonite bacteriana após terapêutica endoscópica de uma angiodisplasia no cego com árgon plasma e injecção de adrenalina. Não se observou evidência imagiológica de perfuração. Foi instituída terapêutica antibiótica intra-peritoneal com sucesso. Conclusão: Este caso sublinha a necessidade de remoção do liquido de diálise peritoneal associado à instituição prévia de antibioterapia profiláctica de largo espectro, antes da realização de terapêutica endoscópica no decurso de uma colonoscopia.

Background: Peritonitis remains a serious problem for patients on peritoneal dialysis, being a leading cause to admissions, mortality and catheter loss with need for hemodialysis. Patients undergoing colonoscopy are at increased risk, presumably from bacteria translocation. Current guidelines for antibiotic prophylaxis don’t emphasise their need in this subset of patients. Case Report: A 57-year-old man on continuous ambulatory peritoneal dialysis (CAPD) developed bacterial peritonitis following cecal vascular ectasia - endoscopic treatment with argon plasma coagulation and injection therapy. There was no imaging evidence for perforation. Successful treatment was achieved with intraperitoneal antibiotics. Conclusion: The case underscores the need for emptying the peritoneal cavity of dialysate in peritoneal dialysis patients in association with large-spectrum antibiotic prophylaxis, before endoscopic treatment during colonoscopy.

In this work, a finite volume formulation developed for two-dimensional models is extended to deal with axisymmetric models of heat conduction applications. This formulation uses a vertex centered finite volume method and it was implemented using an edge-based data structure. The time and domain discretization using triangular meshes is described in details, including the treatment of boundary conditions, source terms, and domains with multiple materials. The proposed formulation is validated and proves to be effective and flexible through the solution of simple model problems.

In recent years, there has been a significant level of research on the application of unstructured mesh methods to the simulation of a variety of engineering and scientific problems. Great progress has been achieved in such area and one of the most successful methodologies consists on the use of the Finite Volume Method (FVM). The unstructured FV formulation is very flexible to deal with any kind of control volume and therefore any kind of unstructured meshes, which are particularly important when complex geometries or automatic mesh adaptation are required. In this article, an unstructured finite volume vertex centered formulation, which was implemented using an edge-based data structure, is deduced and detailed for the solution of heat conduction problems. The numerical formulation is initially described considering a tri-dimensional model and latter particularized for bi-dimensional applications using triangular meshes. The presented procedure is very flexible and efficient to solve potential problems. It can also be extended to deal with a broader class of applications, such as models involving convection-diffusion-reaction terms, after considering the appropriate discretization of the convection-type term. In order to demonstrate the potentiality of the method, some model problems are investigated and the results are validated using analytical or other well-established numerical solutions.

Antimicrobial activities of “babaçu” (Orbignya martiana), “cardo santo” (Argemone mexicana), “mentrasto” (Ageratum conyzoides), “cavalinha” (Equisetum yeamalis) and “terramicina” (Alternanthera brasiliana), used by Brazilian population as antiinflamatory medicine, were studied on Staphylococcus aureus. The freezer dried hydroalcoholic extracts solutions were tested for 7 strains of Staphylococcus aureus, which two of those are methicillin resistant (MRSA). The diffusion method on agar-agar, using holes technique, with tetracycline chlorydrate as standard. “Babaçu”, “cardo santo” and “terramicina” showed antimicrobial activity, within of those “terramicina” inhibited 6 strains, presenting zone inhibition of 22 mm compared to standard antibiotic (34 mm), except the seventh strain which was also tetracycline resistant.

Os fungos ectomicorrízicos são capazes de tolerar concentrações de metais pesados tóxicas às plantas hospedeiras, apesar de serem adversamente influenciados pelo excesso de alguns metais. Avaliou-se o crescimento de um isolado de Pisolithus tinctorius e outro de Suillus bovinus em meio de cultura líquido com doses crescentes de sais de Zn, Cu ou Cd adicionados individualmente em frascos de 125 mL que continham 50 mL de meio Mellin-Norkrans modificado (MNM), em pH 4,8. Os fungos cresceram por 20 dias em câmara de crescimento a 28ºC. O crescimento dos fungos foi inibido com a elevação das concentrações dos metais, porém de forma diferenciada. As concentrações suficientes para inibir 50% do crescimento foram de 2,71 x 10-3 mol L-1 de Zn, 1,18 x 10-3 mol L-1 de Cu e 12,2 x 10-6 mol L-1 de Cd, para o P. tinctorius, e de 2,15 x 10-3 mol L-1 de Zn, 0,12 x 10-3 mol L-1 de Cu e 7,2 x 10-6 mol L-1 de Cd, para o S. bovinus. O efeito inibitório dos metais sobre o crescimento dos fungos seguiu a seguinte ordem decrescente: Cd > Cu > Zn. O isolado de S. bovinus apresentou tolerância ao Zn similar à observada para o P. tinctorius, mas foi menos tolerante que este em relação aos outros dois metais. O crescimento de P. tinctorius foi favorecido por pequena dose de Cu. A produção de pigmentos extracelulares nestes isolados foi estimulada por todos os metais estudados. O P. tinctorius, o mais tolerante, produziu mais pigmentos extracelulares por grama de micélio, o que sugere a relação positiva entre a capacidade de produção de pigmentos e a tolerância aos metais.

Ectomycorrhizal fungi are able to tolerate toxic heavy-metal concentrations in host plants, although being also negatively affected by excessive metal. Isolates of Pisolithus tinctorius and Scleroderma bovinus were grown for 20 days at 28°C in a liquid medium with increasing levels of Zn, Cu and Cd sulfates in 125 mL conical flasks containing 50 mL of MMN medium, adjusted to pH 4.8. Fungi growth was inhibited by heavy metal increasing concentration, which was different for fungi and metals. The 50% effective concentrations inhibiting growth were 2.71 x 10-3 mol L-1 of Zn, 1.18 x 10-3 mol L-1 of Cu and 12.2 x 10-6 mol L-1 of Cd to the P. tinctorius; and of 2.15 of Zn, 0.12 x 10-3 mol L-1 of Cu and 7.2 x 10-6 mol L-1 of Cd to the S. bovinus. The inhibiting heavy-metal effect on growth was in the following sequence: Cd > Cu > Zn. The fungus S. bovinus demonstrated Zn tolerance similar to P. tinctorius, being less tolerant to Cu and Cd. The growth of P. tinctorius was favored by addition of a low amount of Cu. Production of extracellular pigments by the two isolates was enhanced by the addition of all the heavy metals studied. The fungus P. tinctorius produced more pigments per gram of mycelia, suggesting that there was a positive relationship between pigment production capacity and heavy-metal tolerance.

Os fungos ectomicorrízicos podem proteger a planta hospedeira da toxidez dos metais pesados. Contudo, a contaminação excessiva do solo por metais pode inibir o crescimento e a atividade destes, prejudicando a simbiose micorrízica. Avaliou-se o crescimento de nove isolados de Pisolithus tinctorius, dois de Suillus bovinus e um de Scleroderma sp. quanto ao efeito da adição de misturas de solo contaminado por Zn, Cd, Cu e Pb com areia em meio Melin-Norkrans modificado líquido, tendo sido a mistura testada em várias proporções. A adição de solo contaminado ao meio de cultura reduziu o crescimento de todos os isolados, exceto o PT-306 em meio que continha a mistura de solo-areia com baixas proporções de solo contaminado. Os isolados apresentaram grande variação intra e interespecí-fica em relação à tolerância à contaminação do meio via solo contaminado. Em geral, os isolados de P. tinctorius foram mais tolerantes que os de S. bovinus e o de Scleroderma sp., destacando-se o isolado PT-306, que foi considerado tolerante. Os demais isolados estudados apresentaram respostas variadas, mostrando-se os isolados de S. bovinus considerados, na literatura, como tolerantes a Zn, sensíveis à adição de solo contaminado ao meio. A produção de pigmentos extracelulares pelos isolados PT-306 e SB foi estimulada pela adição de solo contaminado ao meio de cultura e a maior produção de pigmentos do PT-306 pode estar envolvida com a maior tolerância deste à contaminação por metais pesados. O crescimento do isolado PT-306 aumentou com a adição da mistura solo-areia com pequenas proporções de solo contaminado ao meio de cultura. A adição de solo contaminado ao meio de cultura mostrou-se eficiente para avaliação do impacto da contaminação do solo por vários metais sobre os fungos ectomicorrízicos.

Ectomycorrhizal symbiosis can play a crucial role in protecting plant roots from heavy metals. However, a high heavy metal contamination can inhibit ectomycorrhizal fungi growth and activity, negatively influencing mycorhizal symbiosis. The growth of nine isolates of Pisolithus tinctorius, two of Suillus bovinus and one of Scleroderma sp. was assessed to evaluate the effect of Zn, Cd, Cu and Pb contaminated soil-sand mixes added to the liquid culture media, at different proportions. Addition of contaminated soil to the media reduced mycelial growth of all isolates, except of PT-306 at media with low proportion of contaminated soil mixes. The isolates showed inter and intra-specific variations in multiple contaminated soil. In general, Pisolithus isolates were more tolerant than those of S. bovinus or Scleroderma sp., with PT-306 being the most tolerant. S. bovinus isolates considered tolerant to Zn were sensitive to multiple soil contamination. Production of extracellular pigments by PT-306 and SB was enhanced by either addition of contaminated soil and a larger production of PT-306 pigments can be involved with its greater tolerance to heavy metals. PT-306 growth was favored by the addition of a low proportion of contaminated soil into the media. The addition of heavy metal contaminated soil into media was efficient to assess the impact of heavy metal multi contamination on ectomycorrhizal fungi.